Белки
<<  Бесклеточные системы транскрипции-трансляции: новые возможности для рекомбинантной продукции мембранных белков и их доменов РНК  >>
Получение рекомбинантных белков как этап создания
Получение рекомбинантных белков как этап создания
Биофармацевтический рынок (C
Биофармацевтический рынок (C
Получение рекомбинантных белков как этап создания
Получение рекомбинантных белков как этап создания
Этапы создания препаратов на основе рекомбинантных белков
Этапы создания препаратов на основе рекомбинантных белков
Характеристики различных типов экспрессионных систем
Характеристики различных типов экспрессионных систем
A.
A.
A.
A.
Посадка праймеров при замене редких кодонов в структурной части гена
Посадка праймеров при замене редких кодонов в структурной части гена
Схема синтеза гена свиного ИФН-
Схема синтеза гена свиного ИФН-
A.
A.
Codon Adaptation Index (CAI)
Codon Adaptation Index (CAI)
A.
A.
А.
А.
A.
A.
Видоспецифичность интерферонов
Видоспецифичность интерферонов
Рекомбинантные
Рекомбинантные
Действие ИФН в составе препаратов
Действие ИФН в составе препаратов
Спасибо за внимание
Спасибо за внимание

Презентация: «Получение рекомбинантных белков как этап создания лечебно-профилактических препаратов». Автор: maximus. Файл: «Получение рекомбинантных белков как этап создания лечебно-профилактических препаратов.ppt». Размер zip-архива: 6941 КБ.

Получение рекомбинантных белков как этап создания лечебно-профилактических препаратов

содержание презентации «Получение рекомбинантных белков как этап создания лечебно-профилактических препаратов.ppt»
СлайдТекст
1 Получение рекомбинантных белков как этап создания

Получение рекомбинантных белков как этап создания

лечебно-профилактических препаратов

М. И. Потапович БГУ, Минск 2011 г.

2 Биофармацевтический рынок (C

Биофармацевтический рынок (C

L. Barton, 2010)

Мировой рынок биофармацевтической продукции в 2010 г. составил около $100 млрд. К 2015 г. – более $170 млрд. (65% - рекомбинантные белки) В сегменте негликозилированных рекомбинантных белков первую позицию занимает интерферон ($4 млрд. к 2014 г., из них альфа-интерферон – $1,5 млрд.)

3 Получение рекомбинантных белков как этап создания
4 Этапы создания препаратов на основе рекомбинантных белков

Этапы создания препаратов на основе рекомбинантных белков

Получение продуцента

Культивирование (ферментация)

Отделение целевого продукта

Создание лекарственной формы

Определение специфической активности

Очистка рекомбинантного белка

5 Характеристики различных типов экспрессионных систем

Характеристики различных типов экспрессионных систем

+/-

(+)/-

-

-

+/-

+

+

+

-

+

+

+

+/-

+/-

-

-

-

+

+

+

Характеристика

Бактерии

Дрожжи

Клетки насекомых

Клетки млекопитающих

Образование телец включения

Секреция

Гликозилирование

Протеолитическая деградация

Другие посттрансляционные модификации

6 A.

A.

B.

Накопление свиного (A) и куриного (B) ИФН-? в клетках E. coli BL21 (?DE3) и E. coli BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL

7 A.

A.

B.

A. Структурная часть гена куриного ИФН-? B. Структурная часть гена свиного ИФН-? Цветом выделены редко встречающиеся в E. coli аминокислотные кодоны. AGG/AGA/CGA – аргинин, CTA – лейцин, CCC – пролин, GGA – глицин

8 Посадка праймеров при замене редких кодонов в структурной части гена

Посадка праймеров при замене редких кодонов в структурной части гена

свиного ИФН-?

9 Схема синтеза гена свиного ИФН-

Схема синтеза гена свиного ИФН-

при замене редких кодонов

agg ? cgt aga ? cgt ccc ? ccg gga ? ggc Стадия 1 (матрица – тотальная ДНК, выделенная из крови)

Стадия 2

Стадия 3

Стадия 4

10 A.

A.

B.

A. Структурная часть гена лошадиного ИФН-? B. Структурная часть гена бычьего ИФН-? Цветом выделены редко встречающиеся в E. coli аминокислотные кодоны. AGG/AGA – аргинин, CTA – лейцин, CCC – пролин, GGA – глицин

11 Codon Adaptation Index (CAI)

Codon Adaptation Index (CAI)

CAI – величина, показывающая частоту использования кодонов в данном гене относительно частоты использования кодонов в референсном наборе генов Ген куриного ИФН-?: CAI = 0,435 Ген свиного ИФН-?: CAI = 0,330 Ген свиного ИФН-? с заменой редких кодонов = 0,544 Ген лошадиного ИФН-?: CAI = 0,340 Синтетический ген бычьего ИФН-?: CAI = 1,0 (Расчет с использованием программы CodonW (J. Peden))

12 A.

A.

В.

Накопление лошадиного ИФН-? (A) и бычьего ИФН-? (B) в клетках E. coli BL21 (?DE3)

13 А.

А.

В.

С.

А. Тельца включения в клетках E. coli (S. Betts, 1998) В. Электронная микрофотография клеток E. coli BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL-pIP2403 (трансмиссионный электронный микроскоп Philips CM120 BioTwin), выращенных без индукции ИПТГ С. Электронная микрофотография клеток E. coli BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL-pIP2403 после индукции 0,5 ммоль/л ИПТГ в течение 3 часов

14 A.

A.

В.

Бычий ИФН-? (А) после очистки из телец включения (5 стадий) и бычий ИФН-? (B), очищенный из супернатанта после разрушения клеток (1 стадия)

15 Видоспецифичность интерферонов

Видоспецифичность интерферонов

Интерферон птиц ?

Интерферон КРС

16 Рекомбинантные

Рекомбинантные

-интерфероны

Субстанция интерферона рекомбинантного Вирусные заболевания Иммуномодулятор Стрессовые состояния

Интерферон + витамины Гиповитаминозы Вирусные заболевания Иммуномодулятор

Интерферон + антибиотики (Гентаферон, Линкоферон и др.) Смешанные инфекции Иммуномодулятор

17 Действие ИФН в составе препаратов

Действие ИФН в составе препаратов

И, возможно, самое главное! 14 – многократное усиление антибактериального действия антибиотиков, снимая при этом их иммунодепрессирующий эффект на организм животного

1 - противовирусный эффект; 2 - подавление роста и развития внутриклеточных инфекционных агентов невирусной природы (хламидии, риккетсии, бактерии, простейшие); 3 - увеличение лизоцимной активности сыворотки крови; 4 – увеличение бактерицидной активности сыворотки крови; 5 – антитоксическое и антистрессовое действие; 6 – радиопротективный эффект; 7 – стимуляция макрофагов и усиление фагоцитоза; 8 – усиление продукции антител; 9 – активизация естественных киллерных клеток; 10 – усиление синтеза простагландинов; 11 – стимуляция освобождения гистамина базофилами; 12 – усиление формирования антигенов ГКГ; 13 – подавление гиперчувствительности замедленного типа;

18 Спасибо за внимание

Спасибо за внимание

«Получение рекомбинантных белков как этап создания лечебно-профилактических препаратов»
http://900igr.net/prezentacija/biologija/poluchenie-rekombinantnykh-belkov-kak-etap-sozdanija-lechebno-profilakticheskikh-preparatov-214136.html
cсылка на страницу

Белки

11 презентаций о белках
Урок

Биология

136 тем
Слайды
900igr.net > Презентации по биологии > Белки > Получение рекомбинантных белков как этап создания лечебно-профилактических препаратов