Презентация на тему «Проблемы преаналитического этапа Практика и теория Иркутский областной консультативно-диагностический центр»

Проблемы преаналитического этапа Практика и теория Иркутский областной

консультативно-диагностический центр

Мирошниченко Иван Андреевич miroshnichenko@dc.baikal.ru

Научно-практический семинар «Преаналитический этап клинико-лабораторных исследований. Современные подходы» 29 октября 2014 года ГБУЗ «Иркутская государственная областная детская клиническая больница»

Подготовка пациента для взятия крови из вены

Пациент должен быть информирован заранее о планируемом заборе биоматериала, о правилах подготовки к сдаче биоматериала

Кровь собирается натощак. Некоторые тесты (напр. Холестерин, липидограмма) требуют более длительного воздержания от еды перед исследованием

Уровень некоторых гормонов связан с суточными (кортизол) и иными ритмами секреции (половые гормоны), забор крови должен быть осуществлен с учетом данных ритмов

На результаты оказывает влияние психоэмоциональная а также физическая нагрузка непосредственно перед взятием биоматериала (требуется минимум 30-минутный отдых)

На результаты оказывает влияние курение в день забора биоматериала и прием алкоголя, в том числе накануне исследования.

Забор крови осуществляют в спокойном психофизическом состоянии пациента

Техника взятия венозной крови

Порядок взятия крови

Внимание: пробы на бакпосев берут первыми

Техника взятия венозной крови

Сразу после взятия крови аккуратно переверните пробирки 8-10 раз для обеспечения полного перемешивания реагента и крови.

Однократный переворот: поверните наполненную пробирку крышкой вниз и верните в исходное положение.

Техника взятия венозной крови

ВНИМАНИЕ: Не встряхивайте пробирки. Энергичное перемешивание может вызвать вспенивание или гемолиз. Недостаточное или медленное перемешивание пробирок для сыворотки может замедлить образование сгустка. В пробирках с антикоагулянтами неправильное перемешивание может привести к склеиванию тромбоцитов, образованию сгустка и / или недостоверным результатам анализа.

Гемостаз

!Перевернуть 4 раза !

Подготовка образцов для исследования системы гемостаза требует особого внимания

Время наложения жгута - не более 1 мин

После набора крови пробирки аккуратно перемешиваются путем переворачивания на 180 С не более 4-5 раз. НЕ ВСТРЯХИВАТЬ ПРОБУ!!!

Для развернутого коагулологического исследования, как правило, необходимо взятие крови в несколько пробирок

В отдельные пробирки необходимо брать следующие пробы: ~ чувствительные к внешним условиям; ~ на исследование функциональной активности тромбоцитов; ~ требующие охлаждения; ~ предназначенные для хранения и транспортировки.

Заполнение вакуумной пробирки точно до метки. Оптимальным вариантом является закрытая вакуумная система, позволяющая провести точное дозирование порции крови.

Обработка проб для исследования системы гемостаза

!Перевернуть 4 раза !

Сразу после взятия крови – поместить ее в термоконтейнер или провести центрифугирование. Нельзя открывать пробирки до начала аналитической стадии исследования.

Необходимо соблюдать правильный температурный режим хранения, транспортировки и обработки проб. Пробы крови для коагулологических исследований следует доставлять с использованием термоконтейнеров при постоянной температуре в пределах 22–24 °C. Время доставки пробы для исследования в лабораторию не должно превышать 45 мин.

Сроки работы с биоматериалом

Каждый тип проб в соответствующих пробирках имеет свой регламент обработки

Особенности заполнения пробирок для отправки в ИДЦ

Забор крови осуществляейте в типы пробирок, строго соответствующие заказанным исследованиям (смотрите направление!). Для биохимии, иммунохимии – вакутейнер с красной крышкой. Внимание! Одного полностью заполненного вакутейнера хватает для выполнения примерно 20 тестов. Пожалуйста, не набирайте лишних вакутейнеров! При одновременном заказе ПЦР и полного гематологического анализа забор крови производится в отдельные вакутейнеры (с сиреневой крышкой) – один для ПЦР, второй для полного гематологического анализа. Если необходимы дополнительные исследования в пробирке с сиреневой крышкой – наберите дополнительную пробирку

Техника центрифугирования

Гель

Гель

Правила центрифугирования

Пробирки с антикоагулянтами: центрифугировать и отобрать пробу настолько быстро, насколько это возможно

Пробирки с сывороткой центрифугировать не ранее чем через 30 минут и не позже чем через 2 часа.

Предпочтительное использование горизонтальных роторов

При установке пробирок необходимо убедиться, что крышка не опирается на стенки стакана центрифуги

Угловой ротор – лучше не использовать

Предпочтительно использовать центрифуги с горизонтальным ротором

Параметры центрифугирования

ОЦС = 1.118 x радиус* x (об/мин/1000)?

Оцс

Время

Пробирки для коагулологии

Богатая тромбоцитами плазма

150 g

5 мин.

Бедная тромбоцитами плазма

1500 – 2000 g

10 мин.

Свободная от тромбоцитов плазма

2500 – 3000 g

20 мин.

Пробирки для сыворотки

Пробирки для сыворотки с гелем Пробирки для сыворотки с гранулами

1800 g 1800 g

10 мин. 10 мин.

Пробирки для плазмы

Пробирки с гепарином и гелем Пробирки с ЭДТА и гелем

2200 g 1800 – 2200 g

15 мин. 10 мин.

*Радиус измеряется от центра вращения до дна пробирки при ее максимально удаленном расположении.

Параметры центрифугирования

Корректное использование значений g – относительной центробежной силы (ОЦС). ОЦС (g) ? скорость (об/мин).

температура не должна опускаться ниже 15С и подниматься выше 24С (Наиболее полное отделение сыворотки и плазмы происходит при температуре 20-22С).

Из рекомендуемого времени центрифугирования необходимо вычесть время разгона и торможения.

ОЦС = 1.118 x радиус* x (об/мин/1000)?

*Радиус измеряется от центра вращения до дна пробирки при ее максимально удаленном расположении.

Параметры центрифугирования

Всегда следуйте рекомендациям производителя центрифуги (руководство должно быть на рабочем месте)

В случае возникновения вопросов по работе центрифуги – всегда связывайтесь с представителями фирмы производителя.

Необходимо правильно рассчитанные параметры центрифугирования напечатать в виде краткой инструкции и сделать доступным для лаборантов и врачей

ОЦС = 1.118 x радиус* x (об/мин/1000)?

*Радиус измеряется от центра вращения до дна пробирки при ее максимально удаленном расположении.

Техника центрифугирования

Центрифугирование сыворотки сразу после взятия: виден сгусток фибрина.

Гемолиз – проблема несоблюдения Техники забора крови

Интерференция. По Kroll и Elin – «влияние вещества, присутствующего в образце, которое изменяет истинное значение результата. Гемолиз – наличие свободного гемоглобина в плазме, сыворотке крови Причины: эндогенные, технологические. Видимый на глаз гемолиз >50 мг/дл (от 30 до 50) Минимальный гемолиз, оказывающий влияние на измеряемый показатель 10 мг/дл

Причины гемолиза

Возможная причина

Способ решения проблемы

Слишком сильное сдавление вены (больше 1 мин)

Точный контроль времени наложения жгута (не более 1 мин)

Перенос крови в пробирку с помощью шприца

Использовать специальные двусторонние иглы для вакуумных пробирок Использовать вакуум-шприцы

Слишком интенсивное перемешивание образца

Аккуратно перевернуть пробирку 6-8 раз, точное соблюдение правил

Пробирка неадекватно заполнена

Контролировать, чтобы пробирка была заполнена до черной метки ( + 10%). Не использовать пробирки, потерявшие вакуум

Маркировка образца

Выполняется с целью корректной идентификации биологического материала Данные могут наноситься без штрих-кода (отсутствие ЛИС в лаборатории) Данные сопровождаются штрихкодированием (регистрация с помощью ЛИС)

Маркировка образца штрихкодированием

Позволяет закодировать значительную часть информации: Данные пациента Дату регистрации биоматериала Организацию, направившую биоматериал Другая информация (тип биоматериала, заказанные тесты и пр.) Значимо уменьшает количество ошибок Значимо ускоряет скорость обработки (регистрации) биоматериала Важно соблюдение правил штрихкодирования!

Правила маркировки образцов (вакуумные пробирки)

Правильно

Не правильно

Порядок наклейки штрих-кодов для ИДЦ

«Триплет» штрихкодов

Образец 1

Образец 2

Направление

Порядок наклейки штрих-кодов для ИДЦ

«Триплет» штрихкодов

Образец 1

Направление

Образец 2

Заполнить еще одно направление и оформить по общим правилам

Образцы 3, 4 и т.д.

Порядок наклейки штрих-кодов для ИДЦ

«Триплет» штрихкодов

Направление

Единственный образец

Выбросить!

Порядок наклейки штрих-кодов для ИДЦ

«Триплет» штрихкодов

Направление

Единственный образец

Оставшийся штрих-код нельзя наклеивать на другие бланки

Основные ошибки маркировки штрихкодированных образцов

Не наклеенный штрих-код Наклеивание поврежденного штрихкода, либо повреждение его при наклеивании Штрих-код наклеен поперек пробирки Штрих-код наклеен на свободное от ярлыка пробирки место Не соблюдено соответствие наклеенного штрихода на образец и направление Данные пациента нанесены на линии штрихкода

Основные ошибки маркировки штрихкодированных образцов

Основные ошибки маркировки штрихкодированных образцов

Правила заполнения направлений

Бланк направления в ИДЦ необходимо взять в ИДЦ. Не используйте ксерокопированные бланки! Пожалуйста, ничего не прикрепляйте к бланкам направлений — скрепки, стикеры и т.д. Бланки направлений нельзя мять, сгибать и сворачивать в трубочку. Дата и время забора крови сделаны в полном формате – в поле дата указывается — число.месяц, а время - час.минуты.

Правила заполнения направлений

При заказе исследований методом ПЦР необходимо указывать материал, который отправляется на исследование. Например, так:

Правила заполнения направлений

Заполняется шариковой, капиллярной или гелевой ручкой ЧЕРНЫМИ или ТЕМНО-СИНИМИ чернилами ЗАГЛАВНЫМИ ПЕЧАТНЫМИ БУКВАМИ. Образец заполнения находится на лицевой стороне направления внизу страницы.

Поля, обязательные для заполнения: ФИО Дата рождения (полностью!) Данные полиса ОМС (серия, номер, номер договора, наименование страховой медицинской организации). Для пациентов, имеющих полисы ОМС других регионов РФ (не Иркутской области), необходимо прикладывать к направлению копию полиса. Контактный телефон лечащего врача Поля, содержащие информацию о параметрах пациента и биоматериала (срок беременности, объем суточной мочи и пр.)

Правила заполнения направлений

Правильно

Не правильно

Заказ исследований – в клеточке напротив необходимого исследования поставить V или Х.

Правила заполнения направлений

Если вы ошиблись и поставили ненужную отметку... Просто зачеркнуть недостаточно! Компьютер — не человек, он этого не поймет. Есть два варианта это исправить — воспользоваться корректором и замазать белой краской неправильную отметку, либо полностью закрасить квадрат с меткой чернилами. После назначения всех исследований в поле «Общее количество отметок» указать общее число заказанных исследований.

Транспортировка биоматериала

Основные правила работы с термосумками

Уложить хладоэлементы в морозильную камеру с температурой -20(+-4С) на 15-20 часов

Разложить хладоэлементы на плоскую поверхность для оттаивания на 30-40 минут

Готовность определить путем появления первых всплесков хладоагента при встряхивании

Протереть хладоагенты сухой ветошью и уложить их по боковым стенкам контейнера

Для обеспечения Т 0-8С (без заморозки)

Основные правила работы с термосумками

Уложить хладоэлементы в морозильную камеру с температурой -30(+-4С) на 15-20 часов

Протереть хладоагенты сухой ветошью, поместить их в полиэтиленовые пакеты

Уложить хладоагенты по боковым стенкам контейнера

Для обеспечения Т ниже 0С (в замороженном виде)

Транспортировка биоматериала

Спасибо за внимание