ВИЧ
<<  Вакцинация детей с перинатальным контактом по ВИЧ и ВИЧ-инфицированных Природно-очаговые трансмиссивные инфекции Забайкалья  >>
Иммунологические маркеры развития перинатальных инфекций
Иммунологические маркеры развития перинатальных инфекций
Инфекционная перинатальная патология
Инфекционная перинатальная патология
Инфекционная перинатальная патология
Инфекционная перинатальная патология
Консенсус между специалистами по вопросам диагностики: как его достичь
Консенсус между специалистами по вопросам диагностики: как его достичь
Возможности лаборатории
Возможности лаборатории
Метод (Цель)
Метод (Цель)
Степень активации клеточного иммунитета
Степень активации клеточного иммунитета
Пцр
Пцр
Токсоплазмоз (лабораторная диагностика)
Токсоплазмоз (лабораторная диагностика)
Парвовирусная инфекция В19
Парвовирусная инфекция В19
Объем исследований
Объем исследований
Женщины, родившие детей с ВУИ: результаты исследования плаценты (ПЦР;
Женщины, родившие детей с ВУИ: результаты исследования плаценты (ПЦР;
Внутриутробная гибель плода
Внутриутробная гибель плода
Женщины с внутриутробной гибелью плода
Женщины с внутриутробной гибелью плода
Женщины с внутриутробной гибелью плода
Женщины с внутриутробной гибелью плода
2 этап (амбулаторно-поликлинический) Выявление причинно-факторных
2 этап (амбулаторно-поликлинический) Выявление причинно-факторных
VI
VI
Дополнительные лабораторные тесты при преэклампсии
Дополнительные лабораторные тесты при преэклампсии
IV
IV
V. Реализация ВУИ у новорожденных
V. Реализация ВУИ у новорожденных
Уровень цитокинов в плазме крови новорожденных с ВУИ (2А) и
Уровень цитокинов в плазме крови новорожденных с ВУИ (2А) и
Распределение лимфоцитов периферической крови с использованием
Распределение лимфоцитов периферической крови с использованием
VI
VI
Стратификация риска развития ВУИ (продолжение)
Стратификация риска развития ВУИ (продолжение)
Установлены маркеры риска развития ВУИ (данные по программе R_MED)
Установлены маркеры риска развития ВУИ (данные по программе R_MED)
С помощью прогностической таблицы рассчитывается риск ВУИ в баллах
С помощью прогностической таблицы рассчитывается риск ВУИ в баллах
Алгоритм ведения недоношенных новорожденных (из группы высокого риска
Алгоритм ведения недоношенных новорожденных (из группы высокого риска
Алгоритм ведения доношенных новорожденных (из группы высокого риска по
Алгоритм ведения доношенных новорожденных (из группы высокого риска по
Благодарю за внимание
Благодарю за внимание

Презентация на тему: «Иммунологические маркеры развития перинатальных инфекций». Автор: Админ. Файл: «Иммунологические маркеры развития перинатальных инфекций.ppt». Размер zip-архива: 1588 КБ.

Иммунологические маркеры развития перинатальных инфекций

содержание презентации «Иммунологические маркеры развития перинатальных инфекций.ppt»
СлайдТекст
1 Иммунологические маркеры развития перинатальных инфекций

Иммунологические маркеры развития перинатальных инфекций

Долгих Т.И., Шелев М.В., Тирская Ю.И., Белкова Т.Н.

2 Инфекционная перинатальная патология

Инфекционная перинатальная патология

За последние 7 лет в г. Омске: Отмечается рост перинатальных потерь с увеличением доли инфекций в их структуре (увеличение показателя несостоявшегося выкидыша с 7,3 до 8,8 на 100 родов) Отмечается высокий уровень антенатальной смертности (среднемноголетний показатель 4,9 на 1000 родившихся живыми и мертвыми). На фоне снижения младенческой смертности остается высокой младенческая заболеваемость. Отмечается выраженный рост заболеваемости внутриутробными инфекциями доношенных новорожденных (Тпр.=9,0%; р<0,05). Возросла частота случаев задержки внутриутробного развития плода (ЗВУР) . В формирование перинатальной патологии значительный вклад вносят герпесвирусы с повышением значимости ВЭБ, ВГЧ 6 типа, вирусно-бактериальных ассоциаций.

3 Инфекционная перинатальная патология

Инфекционная перинатальная патология

Преобладание малосимптомного течения перинатальной инфекции осложняет постановку диагноза. Продолжается поиск эффективных маркеров реализации внутриутробной инфекции у плода и новорожденного Необходимо разработать методологическую основу регионально ориентированной программы эпидемиологического мониторинга за инфекционной перинатальной патологией. Целесообразна разработка тактики ведения женщины и новорожденного на основе персонифицированного подхода к мониторингу и терапии. Цель: разработка диагностических и прогностических критериев развития внутриутробной инфекции для оптимизации диагностики и лечения женщин и новорожденных с данной патологией

4 Консенсус между специалистами по вопросам диагностики: как его достичь

Консенсус между специалистами по вопросам диагностики: как его достичь

1. Работать вместе над решением клинических задач; 2. Знать и рационально использовать потенциал лаборатории. Клиницисту надо решить: что исследовать, для чего и каким методом? КАЖДОМУ ТЕСТУ – СВОЕ МЕСТО! Медицинской сестре и лаборанту – обеспечить преналитическйи этап Специалисту КДЛ – предложить оптимальный алгоритм, обеспечить достоверность и быстроту выполнения анализа, оказать помощь в интерпретации результатов

5 Возможности лаборатории

Возможности лаборатории

Использование микробиологических методов: - Бактериологический посев на микрофлору - Бакпосев на грибы с определением чувствительности Внедрение новых лабораторных технологий: - ПЦР, ИФА, РИФ, в т.ч. на основе биочипов Иммунохимические метод - Иммуноблот (Line-blot) Широкое внедрение бесприборных методов диагностики Возможность одновременной и оперативной комплексной диагностики группы инфекций Оценка иммунорезистентности с помощью проточной цитометрии и уровня цитокинов

6 Метод (Цель)

Метод (Цель)

Метод (Цель)

Оборудование

Реагенты

Методы, направленные на этиологическую расшифровку

Методы, направленные на этиологическую расшифровку

Методы, направленные на этиологическую расшифровку

Методы, направленные на этиологическую расшифровку

Пцр (днк)

РИФ (антигены, «ранние белки»)

ИФА (специфические IgA, IgM, IgG, IgG-ИА), ИБ

Бактериологический

Иммунологические методы

Иммунологические методы

Проточная цитофлюориметрия

Нефелометрия

Определение уровня цитокинов

Определение уровня цитокинов

Ифа (il)

Проточная флюориметрия (IL-27 plex)

Терцик - «ДНК-технология» АЛА-1/4 - «Biosan» (Латвия)

«Амплисенс», ФГУН ЦНИИЭ Эпидемиологии (Россия)

Микроскоп люминесцентный «Carl Zeiss» (Германия)

«VIRCELL microbiologists» (Испания)

ИФА -анализатор «Elisys Quattro» - (HUMAN, Германия); планшетный спектрофотометр «Multiscan EX» (Финляндия)

ЗАО «Вектор-Бест» и НПО «Диагностические системы» (Россия), «EUROIMMUN» (Германия)

Спектрофотометр «Multiscan EX» (Финляндия)

Genital system® и Vagicult®, (Италия)

Проточный цитофлюориметр «FC-500» (США)

«Beckman-coulter» (США)

Анализатор белков «Turbox Plus» (Финляндия)

«Orion Diagnostica» (Финляндия)

Планшетный спектрофотометр «Multiscan EX» (Финляндия)

ООО «Протеиновый контур», ЗАО «Вектор-Бест» (Россия)

Проточный лазерный иммуноанализатор «BIO-PLEX 200»

«Human cytokine 27-plex», («biorad», США)

7 Степень активации клеточного иммунитета

Степень активации клеточного иммунитета

HLA-DR – активация иммунных клеток. Возможные комбинации: CD3+/ HLA-DR, CD4+/ HLA-DR, CD8+/ HLA-DR, CD14+/ HLA-DR, CD5+/19+/ HLA-DR

8 Пцр

Пцр

Риф

ИФА Иммуноблот

Герпесвирусные инфекции: лабораторная диагностика

Исследуемый материал

Метод

Назначение метода

- Соскобы из очага инфекции (глаза, зев, уретра, цервикальный канал, кожные покровы) - Лейкоцитарная взвесь Ликвор (при поражении мозга) Ткани элиминированных плодов Плацента _________________________ Сыворотка крови (ИФА, ИБ)

Детекция ДНК вирусов

Выявление антигенов Вирусов

IgM, IgG, ИА- IgG IgA (!) Антитела к белкам вируса (ИБ) В ликворе IgG (LSQ/CSQ)

Этиологическая расшифровка HSV-1\2-, CMV-, EBV-, HHV-6 -инфекций

9 Токсоплазмоз (лабораторная диагностика)

Токсоплазмоз (лабораторная диагностика)

Исследуемый материал

Назначение метода

Метод

Этиологическая расшифровка

Выявление антител: - IgM, IgA, IgG IgG низкоавидные - IgA и IgG-avidity к ROP1, MAG1, GRA7,GRA8, SAG1

ПЦР или РИФ

Кровь, ликвор, биоптаты, ткани погибших плодов, плацента

Детекция ДНК /антигенов

ИФА, Иммуноблот (фазы I, II, III,IV)

ИФА (ликвор)

Igg LSQ/CSQ = igg/(ликвор) / igg (сыворотка) (>1,5 !)

10 Парвовирусная инфекция В19

Парвовирусная инфекция В19

Парвовирус В19 – это малого размера ДНК вирус, который быстро размножается и в основном поражает незрелые формы эритроцитов. Исследуемый материал – кровь, ликвор. Основные методы – ПЦР и ИФА

Заболевание вызывает яркие высыпания на коже (краснухоподобный синдром) и артропатии,, анемию и апластический криз. Трансплацентарная передача возможна в 33% случаев формирует многоводие, водянку плода, тяжелые анемии, поражение миокарда. Возможна внутриутробная гибель плода (в 25% случаев) Может приводить к прогрессирующей гидроцефалии (из ликвора выделяется ДНК парвовируса В19) (журнал «Детские инфекции», 2010. - № 4).

11 Объем исследований

Объем исследований

I . Исследование плаценты женщин, родивших детей с ВУИ (n=598) II . Исследование тканей погибших эмбрионов/плодов (n=746) III. Комплексное поэтапное обследование женщин с внутриутробной гибелью плода IV. Обследование женщин с преэклампсией различной степени тяжести с наличием инфекции (n=115) V . Обследование новорожденных с ВУИ и гипоксией мозга (n=104) V I. Обследование пар «мать-ребенок» (n=302)

12 Женщины, родившие детей с ВУИ: результаты исследования плаценты (ПЦР;

Женщины, родившие детей с ВУИ: результаты исследования плаценты (ПЦР;

%)

13 Внутриутробная гибель плода

Внутриутробная гибель плода

В формировании патологии плода в I триместре беременности установлена наиболее важная роль принадлежит бактериальной микрофлоры (Staph., E.coli), во II триместре – U.urealyticum (в виде микст-инфекции), в III триместре – вирусам. Listeria встречается с частотой 17% и 20% при гибели плода в I и во II триместрах. Во II триместре микст-инфекция вызывает гибель плода в 60,05% случаев (в 1,6 раза чаще, чем в I триместре). Установлена роль вирусов: EBV (22,5% и 16,7%), CMV (16,2% и 13,5), HSV-1/2 (12,3% и 10,3%), Rotavirus (28,5% и 15,6%), Rubella (14,6% и 9,8%), PV B19 (3,2% и 9,5%) – в I и во II триместрах ДНК T.gondii обнаружена в 12,4% и в 17,5%.

14 Женщины с внутриутробной гибелью плода

Женщины с внутриутробной гибелью плода

1 этап – оказание неотложной помощи и установление факторов риска* (стационар):

Прогностические критерии развития системной воспалительной реакции: снижение уровня РАИЛ, ИЛ-10 и бактерицидного гуморального фактора лактоферрина (при вирусной и вирусно-бактериальной инфекции) при неизмененном уровне провоспалительных цитокинов - ФНО-? и ИЛ-1?. Повышение концентрации РАИЛ в течение первых суток после элиминации погибшего эмбриона/плода является критерием гнойно-воспалительного поражения плодного яйца и децидуальной ткани, что требует проведения адекватной стандартной терапии с учетом биотопа половых путей женщины. ______________________________ * - Утверждена медицинская технология

15 Женщины с внутриутробной гибелью плода

Женщины с внутриутробной гибелью плода

1 этап – оказание неотложной помощи и установление факторов риска* (продолжение):

наличие мертвого плода 5 недель и более (ведущий фактор); наличие вирусно-бактериальной или бактериальной инфекции; повышенное содержание D-димера и гомоцистеина. Разработана тактика ведения женщин, основанная на применении неинвазивных методов удаления внутриутробно погибших плодов с использованием препаратов (простагландин Е2 и F2?), что позволило снизить количество органоуносящих операций в 5 раз и предотвратить материнскую смертность ______________________________

16 2 этап (амбулаторно-поликлинический) Выявление причинно-факторных

2 этап (амбулаторно-поликлинический) Выявление причинно-факторных

связей у женщин с невынашиванием. Расширенная этиологическая расшифровка. Клинико-лабораторный мониторинг с оценкой системы гемостаза и определением полиморфизмов генов системы гемостаза и врожденного иммунитета. Оценка интерфероновой системы (при герпесвирусных инфекциях) Коррекция нарушений и адекватная прегравидарная подготовка. Результаты: Привело к снижению преждевременного прерывания беременности в 3,7 раза (до 18,7%), антенатальной гибели плода – в 79 раз (до 0,8%). ______________________________ * - Утверждена медицинская технология «Тактика ведения беременных с синдромом потери плода (клинико-лабораторное обоснование)»

Клинико-лабораторный мониторинг и прегравидарная подготовка

17 VI

VI

Иммунологические факторы при преэклампсии

При обследовании 115 беременных с преэклампсией установлено наличие достоверной прямой связи уровня провоспалительного цитокина TNF-? и IFN-?: со степенью тяжести преэклампсии (r = 0,38 и r = 0,46 соответственно); с уровнем панкреатической амилазы (r = 0,35 и r = 0,53 соответственно); с уровнем панкреатической липазы (r = 0,37 для TNF-?); с уровнем D-димеров (r = 0,37 и r = 0,41 соответственно); с активностью АЛТ и АСТ (r = 0,39, r = 0,37 и r = 0,59, r = 0,43 соответственно). При вирусно-бактериальной микст-инфекции имеются более выраженные нарушения со стороны цитокиновой системы, системы гемостаза, печени и поджелудочной железы

18 Дополнительные лабораторные тесты при преэклампсии

Дополнительные лабораторные тесты при преэклампсии

Резюме: 1. Одним из факторов, способствующих усугублению преэклампсии, является повреждение поджелудочной железы за счет усиления процессов перекисного окисления липидов и оксидативного стресса, что может быть обусловлено падением антиоксидантной защиты. 2. Усугублению панкреатической дисфункции и, возможно, панкреатита с ферментативной токсемией, по-видимому, способствует и сдвиг продукции цитокинов в сторону провоспалительных. 3. У беременных с тяжелой степенью уровень TNF-? и IFN-? имеет достоверную связь с основными клинико-лабораторными показателями и уровнем панкреатической амилазы и липазы на фоне снижения антиоксидантной защиты

19 IV

IV

Женщины, родившие детей с ВУИ

Состояние иммунной системы женщин данной группы характеризовалось: достоверным повышением содержания лимфоцитов с фенотипом CD3+/ CD16+ CD56+, CD3+/CD4+ и снижением CD3+/CD8+ Высокий уровень Т-NK отмечался у женщин при гематогенном пути инфицирования герпевирусами Повышением уровня провоспалительных цитокинов (TNF?, IL-1?) Снижением уровня противовоспалительных цитокинов (IL-10)

20 V. Реализация ВУИ у новорожденных

V. Реализация ВУИ у новорожденных

Доказано наличие напряженности иммунитета у детей с верифицированной инфекцией уже в периоде внутриутробного развития, причем развитие иммунного ответа формируется в основном за счет компонентов врожденного иммунитета – цитокинов. Наиболее значимыми критериями реализации внутриутробной инфекции у новорожденных независимо от срока гестации является уровень активированных моноцитов и хемокина интерлейкина-8.

21 Уровень цитокинов в плазме крови новорожденных с ВУИ (2А) и

Уровень цитокинов в плазме крови новорожденных с ВУИ (2А) и

новорожденных с перинатальным поражением мозга гипоксического генеза (2Б), пг/мл

22 Распределение лимфоцитов периферической крови с использованием

Распределение лимфоцитов периферической крови с использованием

моноклональных антител против СD14 и CDHLA-DR, меченых FITC и PE, в группах 1А и 1Б (%).

23 VI

VI

Стратификация риска развития ВУИ

Включает оценку прогностических факторов: 1. Осложненный акушерско-гинекологический анамнез: самопроизвольные аборты, неразвивающаяся беременность, рождение детей с врожденными аномалиями или ВУИ, преждевременные роды, перинатальная гибель плода. 2. Наличие очагов экстрагенитальной инфекции: мочевыделительной системы (хронический пиелонефрит, цистит). 3. Наличие вирусно-бактериальной инфекции и активной герпесвирусной инфекции. 4. Осложненное течение гестационного процесса: рецидивирующая угроза прерывания беременности, воспалительные заболевания нижнего отдела гениталий, наличие хориоамнионита в родах

24 Стратификация риска развития ВУИ (продолжение)

Стратификация риска развития ВУИ (продолжение)

Ультразвуковые маркеры ВУИ : задержка развития плода в сочетании с изменением количества околоплодных вод, множественные кальцинаты плаценты, утолщение плаценты, взвесь в околоплодных водах, нарушение плодово-плацентарного кровотока, многоводие/маловодие. 5. Иммунологические маркеры реализации ВУИ : Повышение провоспалительных цитокинов (IL–1?, ФНО?, IL–8, IL–6), Снижение продукции противовоспалительного цитокина IL–10, IFN-? 6. Предикторы развития осложнений при беременности : Нарушения в системе гемостаза Повышение уровня цитокинов (IL–1?, ФНО?, IL–8) и лактоферрина, Снижение продукции противовоспалительного цитокина IL–10 и IFN-? Повреждение поджелудочной железы (ферментемия) ВЫВОД: Наиболее значимыми критериями развития ВУИ (p*16<-0.05) являются: бактериальный вагиноз + воспалительные заболевания органов малого таза; утолщение плаценты + синдром задержки развития плода; вирусно-бактериальная микст-инфекция; повышение IL–1? >19,25 pg/ml и ФНО? > 24,35 pg/ml.

25 Установлены маркеры риска развития ВУИ (данные по программе R_MED)

Установлены маркеры риска развития ВУИ (данные по программе R_MED)

Количественные: Т-лимф CD3+ p=0.052 Среднее: 64.45, 69.570 C Т-хел CD3+ CD4+ p=0.001 Среднее: 28.323, 37.558 M-У Молекулы адгезии p=0.019 Среднее: 51.85, 66.1 C ИРИ p=0.001 Среднее: 0.9483, 1.4929 M-У IgG p=0.043 Среднее: 9.95, 13.333 M-У ИЛ-10 p=0.065 Среднее: 2.2115, 5.3538 M-У ИЛ-1? р=0.0019 Среднее: 507, 229 М-У ИЛ-8 р=0,003 Среднее: 64.4, 52.5 М-У ФНО р=0,001 Среднее: 61.1, 47.2 М-У Категориальные:

Свидетельство о регистрации программы для ЭВМ № 2011614225 «Статистический анализ клинико-лабораторных данных для прогнозирования риска развития патологии (R_MED)»

"p= 0.080 Методы статистического анализа: построение «дерева решений»: линейного дискриминантного анализа

3. Метода опорных векторов

Кольпит

0

1

Кольпит

0

1

Вуи

Вуи

0

8

8

0

-0,76

1,05

1

9

1

1

0,96

-1,32

26 С помощью прогностической таблицы рассчитывается риск ВУИ в баллах

С помощью прогностической таблицы рассчитывается риск ВУИ в баллах

Менее 13 баллов: низкий риск

Более 13 баллов – высокий риск

Исследование содержания цитокинов IL-1?, ФНО?

Низкий риск: ФНО?<24,35 pg/ml; IL-1?<19,25 pg/ml

Высокий риск (ФНО?>24,35 pg/ml ; IL-1?>19,25 pg/ml )

Расширенный спектр лабораторных исследований для верификации возможных патогенов

Профилактика плацентарной недостаточности

При верификации возбудителя этиотропное лечение, профилактика ПН

При отсутствии возбудителя: профилактика ПН

Здоровый ребенок

Внутриутробное инфицирование

Вуи

Здоровый ребенок

27 Алгоритм ведения недоношенных новорожденных (из группы высокого риска

Алгоритм ведения недоношенных новорожденных (из группы высокого риска

по ВУИ)

Оценка уровня цитокинов в первые сутки после рождения (IL-8; il-1?; лактоферрин)

IL-8: ?34,92 pg/ml

IL-8: ?34,92 pg/ml отсутствие ВУИ

IL-1?

Лактоферрин

Лактоферрин: ?346,6 нг/л риск инфицирования новорожденного

Лактоферрин: ?346,6 нг/л риск ВУИ

IL-1?: ?4,1 pg/ml риск ВУИ

Il-1?: ?4,1 pg/ml риск инфицирования новорожденного

Динамическое наблюдение

Динамическое наблюдение

Этиологическая верификация этиотропное лечение

28 Алгоритм ведения доношенных новорожденных (из группы высокого риска по

Алгоритм ведения доношенных новорожденных (из группы высокого риска по

ВУИ)

оценка уровня цитокинов в первые сутки после рождения (IL-8; ФНО)

IL-8: ?25,57 pg/ml ВУИ

IL-8: ?25,57 pg/ml

IL-8: 5,69-25,57 pg/ml

IL-8: ?5,69 pg/ml отсутствие ВУИ

Фно

ФНО: ?14,37 pg/ml риск инфицирования новорожденного

ФНО: ?14,37 pg/ml отсутствие ВУИ

Динамическое наблюдение

Этиологическая верификация этиотропное лечение

29 Благодарю за внимание

Благодарю за внимание

Для контактов: 644001,г.Омск, 20 лет РККА, д.15. Телефон: 8(3812)36-23-11, 37-03-55, 37-03-43 E-mail: dolgih-ti@mail.ru

«Иммунологические маркеры развития перинатальных инфекций»
http://900igr.net/prezentacija/meditsina/immunologicheskie-markery-razvitija-perinatalnykh-infektsij-245964.html
cсылка на страницу
Урок

Медицина

32 темы
Слайды
900igr.net > Презентации по медицине > ВИЧ > Иммунологические маркеры развития перинатальных инфекций