Болезни
<<  Заболевания системы мочевыделения Заболевания кишечника  >>
Хронические миелопролиферативные заболевания
Хронические миелопролиферативные заболевания
Bcr-abl – негативные хронические миелопролиферативные заболевания
Bcr-abl – негативные хронические миелопролиферативные заболевания
Хронические миелопролиферативные заболевания (ХМПЗ)
Хронические миелопролиферативные заболевания (ХМПЗ)
Общие свойства ХМПЗ:
Общие свойства ХМПЗ:
Трудности диагностики ХМПЗ:
Трудности диагностики ХМПЗ:
Хмпз
Хмпз
Эссенциальная тромбоцитемия (ЭТ)
Эссенциальная тромбоцитемия (ЭТ)
Диагностические критерии ВОЗ 2008 для эссенциальной тромбоцитемии
Диагностические критерии ВОЗ 2008 для эссенциальной тромбоцитемии
Истинная полицитемия (ИП)
Истинная полицитемия (ИП)
Диагностические критерии ВОЗ 2008 для истинной полицитемии
Диагностические критерии ВОЗ 2008 для истинной полицитемии
Сублейкемический миелоз (ИМФ)
Сублейкемический миелоз (ИМФ)
Клинико-патологические критерии (ЕСР)для диагностики сублейкемического
Клинико-патологические критерии (ЕСР)для диагностики сублейкемического
Хмпз
Хмпз
Диагностические критерии ВОЗ 2008 для первичного миелофиброза
Диагностические критерии ВОЗ 2008 для первичного миелофиброза
Хмпз
Хмпз
Определение клинической резистентности и непереносимости
Определение клинической резистентности и непереносимости
Роль Интерферона-альфа в терапии истинной полицитемии
Роль Интерферона-альфа в терапии истинной полицитемии
Анализ 60 больных ИП, ЭТ и СЛМ , леченных препаратами ИФН-альфа Phase
Анализ 60 больных ИП, ЭТ и СЛМ , леченных препаратами ИФН-альфа Phase
ИФН-альфа (ИнтронА):
ИФН-альфа (ИнтронА):
Соотношение тромбогеморрагических осложнений у 19 (73%) б-х ХМПЗ, до и
Соотношение тромбогеморрагических осложнений у 19 (73%) б-х ХМПЗ, до и
Эссенциальная тромбоцитемия
Эссенциальная тромбоцитемия
22
22
Хмпз и тромбозы
Хмпз и тромбозы
Гомоцистеин и тромбозы
Гомоцистеин и тромбозы
Гомоцистеин
Гомоцистеин
?
?
Концентрация гомоцистеина в крови до и после витаминотерапии
Концентрация гомоцистеина в крови до и после витаминотерапии
Хмпз и тромбозы
Хмпз и тромбозы
Новые молекулярные маркеры в дифференциальной диагностике эритремии и
Новые молекулярные маркеры в дифференциальной диагностике эритремии и
ГИПЕРЭКСПРЕССИЯ mrna ГЕНА PRV-1
ГИПЕРЭКСПРЕССИЯ mrna ГЕНА PRV-1
Мутация гена тирозинкиназы jak2 v617f
Мутация гена тирозинкиназы jak2 v617f
Цель исследования
Цель исследования
Задачи исследования
Задачи исследования
Характеристика пациентов вошедших в исследование
Характеристика пациентов вошедших в исследование
МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МАРКЕРЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКЕ
МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МАРКЕРЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКЕ
Роль гена PRV-1 в дифференциальной диагностике между эритремией и
Роль гена PRV-1 в дифференциальной диагностике между эритремией и
УРОВЕНЬ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА PRV-1 У ПАЦИЕНТОВ С УСТАНОВЛЕННЫМ ДИАГНОЗОМ
УРОВЕНЬ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА PRV-1 У ПАЦИЕНТОВ С УСТАНОВЛЕННЫМ ДИАГНОЗОМ
ВАРИАНТЫ ТЕРАПИИ БОЛЬНЫХ ЭРИТРЕМИЕЙ (n=46)
ВАРИАНТЫ ТЕРАПИИ БОЛЬНЫХ ЭРИТРЕМИЕЙ (n=46)
Результаты лечения больных эритремией
Результаты лечения больных эритремией
Уровень экспрессии prv-1 у больных эритремией
Уровень экспрессии prv-1 у больных эритремией
Уровень экспрессии гена prv-1 у больных эритремией, леченых
Уровень экспрессии гена prv-1 у больных эритремией, леченых
Уровень экспрессии гена prv-1 у больных эритремией, получавших
Уровень экспрессии гена prv-1 у больных эритремией, получавших
УРОВЕНЬ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА PRV-1 У БОЛЬНЫХ ЭРИТРЕМИЕЙ, ПОЛУЧАВШИХ
УРОВЕНЬ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА PRV-1 У БОЛЬНЫХ ЭРИТРЕМИЕЙ, ПОЛУЧАВШИХ
Сопоставление уровня экспрессии гена prv-1 и клинического состояния
Сопоставление уровня экспрессии гена prv-1 и клинического состояния
Значение мутации гена Jak2V617F в дифференциальной диагностике между
Значение мутации гена Jak2V617F в дифференциальной диагностике между
Соотношение mRNA Jak2 несущих и не несущих мутацию V617F у пациентов с
Соотношение mRNA Jak2 несущих и не несущих мутацию V617F у пациентов с
47
47
Скрининг периферической крови на мутацию JAK2V617F & измерение уровня
Скрининг периферической крови на мутацию JAK2V617F & измерение уровня
Диагностический алгоритм предполагаемой эссенциальной тромбоцитемии
Диагностический алгоритм предполагаемой эссенциальной тромбоцитемии
Биопсия к.м., окрашивание ретикулина, цитогенетика и скрининг на
Биопсия к.м., окрашивание ретикулина, цитогенетика и скрининг на
Биопсия к.м., окраска триптазой, исследование клональности Т-клеток и
Биопсия к.м., окраска триптазой, исследование клональности Т-клеток и

Презентация: «Хронические миелопролиферативные заболевания». Автор: . Файл: «Хронические миелопролиферативные заболевания.ppt». Размер zip-архива: 991 КБ.

Хронические миелопролиферативные заболевания

содержание презентации «Хронические миелопролиферативные заболевания.ppt»
СлайдТекст
1 Хронические миелопролиферативные заболевания

Хронические миелопролиферативные заболевания

Профессор кафедры клинической лабораторной диагностики Заведующая центром лабораторных исследований ГУЗ Иркутская ордена «ЗНАК ПОЧЕТА» областная клиническая больница, д.м.н., Т.С. Белохвостикова

1

2 Bcr-abl – негативные хронические миелопролиферативные заболевания

Bcr-abl – негативные хронические миелопролиферативные заболевания

атипичные ХМПЗ

классические ХМПЗ

Эссенциальная тромбоцитемия Полицитемия vera Миелофиброз с миелоидной метаплазией

Молекулярные признаки

Клиникопатологические признаки

FIP1L – PDGFRA –позитивные эозинофильные нарушения PDGFRB- реарранжированные ХМПЗ C-kit мутационно-позитивный системный мастоцитоз

Гиперэозинофильный синдром Хронический эозинофильный лейкоз Системный мастоцитоз Хронический миеломоноцитарный лейкоз Ювенильный миеломоноцитарный лейкоз Хронический нейтрофильный лейкоз Неклассифицируемый миелопролиферативный синдром

A.Pardanani, A.Tefferi 2004.

2

3 Хронические миелопролиферативные заболевания (ХМПЗ)

Хронические миелопролиферативные заболевания (ХМПЗ)

ХМПЗ –это клональные заболевания, происходящие из плюрипотентной гемопоэтической стволовой клетки. Результатом клональной экспансии является усиленная пролиферация патологического гемопоэза и появление группы взаимосвязанных синдромов, обусловленных той или иной доминирующей клеточной линией.

3

4 Общие свойства ХМПЗ:

Общие свойства ХМПЗ:

КЛИНИЧЕСКИЕ /ЛАБОРАТОРНЫЕ гиперпродукция одного или более форменных элементов крови при отсутствии определенных стимулов Тромбозы и геморрагии Экстрамедуллярный гемопоэз трансформация в острый лейкоз или развитие миелофиброза КОСТНОМОЗГОВЫЕ Участие плюрипотентной гемопоэтической клетки –предшественницы Гиперклеточность костного мозга и дисплазия мегакариоцитов Независимое от факторов роста формирование колоний in vitro КАРИОЛОГИЧЕСКИЕ И БИОЛОГИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ Хромосомные аномалии –1,8,9, 13q,20q . Повышенная экспрессия PRV-1гена, уменьшенная экспрессия на тромбоцитах белка cMPL, мутация JAK2 (V617F)

4

5 Трудности диагностики ХМПЗ:

Трудности диагностики ХМПЗ:

Сходство клинико-гематологических проявлений между собой. Смена клинических проявлений в процессе течения болезни. Сложности в дифференциальной диагностике (клинической и патогистологической) форм ХМПЗ при отсутствии четких цитогенетических и молекулярных маркеров. Недостаточность клинических исследований, испытаний миелосупрессивных препаратов ? приводит к значительной разнице в подходах к диагностике и лечению ХМПЗ.

5

6 Хмпз

Хмпз

Общий диагностический подход на первом этапе : 1. Терапевтический статус Сосудистые осложнения Увеличение печени и селезенки 2. Показатели гемограммы Преимущественная пролиферация 1-2 или всех ростков кроветворения 1-2-3-ростковая цитопения + спленомегалия (продвинутая или терминальная стадия заболевания) 3. Показатели миелограммы Исключение бластной трансформации Исключение Ph-позитивности 4. Гистоморфологическая характеристика трепаната Дифференцированная оценка для установления конкретной формы нарушения

6

7 Эссенциальная тромбоцитемия (ЭТ)

Эссенциальная тромбоцитемия (ЭТ)

ЭТ – клональное миелопролиферативное заболевание, характеризующееся костномозговой гиперплазией мегакариоцитарного ростка и сопутствующим увеличением числа тромбоцитов.

7

8 Диагностические критерии ВОЗ 2008 для эссенциальной тромбоцитемии

Диагностические критерии ВОЗ 2008 для эссенциальной тромбоцитемии

1. Тромбоциты >/= 450 х 10 /л 2. Пролиферация больших мегакариоцитов со зрелой морфологией. Отсутствие или небольшая гранулоцитарная /эритроидная пролиферация 3. Отсутствие критериев ВОЗ для ХМЛ, ИП, ПМФ, МДС или других миелоидных опухолей 4. Выявление JAK2V617F или других маркеров клональности или отсутствие реактивного тромбоцитоза Диагноз эссенциальной тромбоцитемии требует наличия всех четырех критериев

8

9 Истинная полицитемия (ИП)

Истинная полицитемия (ИП)

ИП - клональное нарушение с вовлечением гемопоэтической стволовой клетки, что приводит к автономной пролиферации эритроидной, миелоидной и мегакариоцитарной клеточных линий. Увеличенная эритроидная пролиферация обычно более выраженная, чем другие клеточные линии и появляется независимо от уровня эритропоэтина.

9

10 Диагностические критерии ВОЗ 2008 для истинной полицитемии

Диагностические критерии ВОЗ 2008 для истинной полицитемии

1. Гемоглобин >180 г/л (муж) , > 165 г/л (жен) Гемоглобин или гематокрит > 99% (c учетом стандарта для возраста, пола,нахождения на высоте) Или - продолжающееся нарастание уровня гемоглобина не связанное с коррекцией препаратами железа Или – повышение массы эритроцитов >25% от установленной нормы 2. Выявление JAK2617F мутации или похожих мутаций малые критерии 1. Трехлинейная пролиферация в костном мозге 2. Низкий или субнормальный уровень сывороточного эритропоэтина 3. Рост эндогенных эритроидных колоний Диагноз ИП требует наличия 2 больших + 1 малого или первого большого + 2 малых критериев

10

11 Сублейкемический миелоз (ИМФ)

Сублейкемический миелоз (ИМФ)

ИМФ это хроническое миелопролиферативное заболевание с клональным гемопоэзом и вторичной (неклональной) гиперпролиферацией фибробластов (стимулированных ростовыми факторами (PDGF, bFGF, TGF-?) из миелоидных клеток, в основном неопластических мегакариоцитов) с увеличением синтеза коллагена. Все это ведет к образованию костномозгового фиброза и эстрамедуллярного гемопоэза в селезенке и других органах.

11

12 Клинико-патологические критерии (ЕСР)для диагностики сублейкемического

Клинико-патологические критерии (ЕСР)для диагностики сублейкемического

миелоза

Клинические критерии А1. Отсутствие других субтипов миелопролиферативных заболеваний ХМЛ или МПЗ. А2. Ранние клинические стадии гемоглобин не менее 120г/л (анемия, 1ст.) умеренная спленомегалия или (по УЗИ более 11см) тромбоцитемия более 400, 600 или 1000х109/л А3. Промежуточная клиническая стадия гемоглобин не более 100г/л (анемия 2ст.) лейко-эритробластическая картина крови или эритроциты в форме капли спленомегалия отсутствие неблагоприятных признаков * А4. Продвинутая клиническая стадия. гемоглобин менее 100г/л (анемия 3ст.) + 1 или больше наличие неблагоприятных признаков *

12

13 Хмпз

Хмпз

Гистологические критерии В1 Мегакариоцитарная и гранулоцитарная миелопролиферация и относительная редукция эритроидных предшественников. Аномальные кластеры, увеличение атипичных гигантских мегакариоцитов. Стадии идиопатического миелофиброза (ИМФ) MF0 префибротическая ст., отсутствие ретикулинового фиброза MF1 MF1 ранняя стадия ИМФ. Небольшой ретикулиновый фиброз. MF2 явные проявления ИМФ. Повышение ретикулинового и/или коллагенового фиброза MF3 явный ИМФ. Коллагеновый фиброз- остеосклероз(эндофитное формирование костей)

13

14 Диагностические критерии ВОЗ 2008 для первичного миелофиброза

Диагностические критерии ВОЗ 2008 для первичного миелофиброза

(сублейкемического миелоза)

1. Мегакариоцитарная пролиферация и атипия + ретикулиновый и/или коллагеновый фиброз В отсутствии ретикулинового фиброза , мегакариоцитарные изменения + повышенная клеточность к.м., гранулоцитарная пролиферация. Часто снижение эритропоэза (т.е. префибротический первичный миелофиброз) 2. Отсутствие критериев ВОЗ для ХМЛ, ИП, МДС или других миелоидных опухолей 3. Выявление JAK2V617F или других маркеров клональности или отсутствие признаков реактивного костномозгового фиброза 1. Лейкоэритробластоз 2. Повышенный уровень ЛДГ малые критерии 3. Анемия 4. Спленомегалия Диагноз ПМФ/СЛМ требует наличия всех трех больших и 2 малых критериев

14

15 Хмпз

Хмпз

Рекомендации по циторедуктивной терапии истинной полицитемии PVSG (2004г) Больные с низким риском развития тромбоза (возраст менее 60 лет , без тромбозов в анамнезе) – флеботомия (гематокритом менее 45%) + аспирин н.д. (осторожно при числе tr> 1500х109/л) Показания к циторедуктивной терапии: 1. Толерантность к флеботомии 2. Стойкий тромбоцитоз 3. Прогрессирующая спленомегалия Выбор циторедуктивной терапии: 1. <40 лет - ИФН-альфа (вторая линия – анагрелид+ флеботомия) 2. >40 лет – Гидреа (вторая линия – анагрелид+ флеботомия; более пожилым пациентам –миелосан. У всех учитывать наличие кардиоваскулярных факторов риска!

15

16 Определение клинической резистентности и непереносимости

Определение клинической резистентности и непереносимости

гидроксимочевины (HU) при эссенциальной тромбоцитемии

Тромбоциты > 600 х10/л через 3 мес приема максимально переносимой дозы гидреа Тромбоциты > 400 х10/л + снижение лейкоцитов < 2,5 х10/л при любой дозе гидреа Тромбоциты > 400 х10/л + снижение гемоглобина < 100 г/л при любой дозе гидреа Появление побочных эффектов (язвы на коже и слизистых, лихорадка)

Вывод – переход на альтернативные методы терапии (анагрелид)

(Barosi G . Leukemia.2007)

16

17 Роль Интерферона-альфа в терапии истинной полицитемии

Роль Интерферона-альфа в терапии истинной полицитемии

Период наблюдения 3-84 мес. Доза ИФН-альфа составляла: 3-35млн. МЕ/нед. На фоне терапии ИФН-альфа отмечалось снижение эритроцитоза, лейкоцитоза и тромбоцитоза Снижение частоты кровопусканий 82% Полная и частичная регрессия спленомегалии 77% 23 б-х после индукции оставались в ремиссии без лечения в течение 34-71 нед. в зависимости от стадии заболевания При развитии рецидива применение ИФН-альфа способствовало индукции второй ремиcсии Вывод: ИФН-альфа ингибирует рост аномального клона у больных истинной полицитемией, что приводит к редукции клинических симптомов. Аnn. Hematol.,2000

17

18 Анализ 60 больных ИП, ЭТ и СЛМ , леченных препаратами ИФН-альфа Phase

Анализ 60 больных ИП, ЭТ и СЛМ , леченных препаратами ИФН-альфа Phase

II study (E5487): a trial of the Eastern Cooperative Oncology Group

Уменьшение гематокрита менее 45% без флеботомии у 50% б. Уменьшение размеров селезенки у 82% больных. ЭТ ответившие -88,2% (n=17; полный ответ -1б., частичный ответ -14 б-х ) ИП ответившие -41,7% (n=12;. полный ответ -1б, частичный ответ -4 б-х) СЛМ ответившие 3,2% (n= 31; полный ответ 0б., частичный ответ -1б.) Причины отмены- побочные действия в 55% случаев.

Radin A.I. et al. Cancer 2003 1;98 (1) :100-9

18

19 ИФН-альфа (ИнтронА):

ИФН-альфа (ИнтронА):

Обладает иммуномодулирующим и противовирусным действием. Прямое подавляющее действие на пролиферацию гемопоэтических предшественников и фибробласты костного мозга. Является антагонистом действия ростовых факторов (PDGF, TGF-?, ?FGF) и др. цитокинов, предотвращая развитие миелофиброза. Не обладает лейкомогенностью и тератогенностью. Вызывает стойкие, полные ремиссии.

Основная проблема – частота побочных реакций, что обусловливает неадекватность терапии и отмену препарата. Возможно, комбинированная терапия, имея различные точки приложения, сможет позволить усилить контроль за пролиферацией с меньшими побочными эффектами

19

20 Соотношение тромбогеморрагических осложнений у 19 (73%) б-х ХМПЗ, до и

Соотношение тромбогеморрагических осложнений у 19 (73%) б-х ХМПЗ, до и

на фоне терапии Интроном А

20

Протокол ГНЦ РАМН «ХМПЗ2003»

21 Эссенциальная тромбоцитемия

Эссенциальная тромбоцитемия

Анализ исходов 155 беременностей у 86 пациенток в соответствии с терапевтическим подходом

Griesshamer M. et al, Semin.Thromb Hemost, 2003

21

22 22

22

23 Хмпз и тромбозы

Хмпз и тромбозы

ПРЕДПОЛАГАЕМЫЕ ФАКТОРЫ РИСКА РАЗВИТИЯ ТРОМБОЗОВ У Б-Х ХМПЗ: Повышенная вязкость крови Гипертомбоцитоз (активация тромбоцитов) Высокий уровень гематокрита Тромбозы в анамнезе Мутации генов – МТГФР (С677Т); фактора V (А506G) (Лейден) и протромбина (G20210A) Гипергомоцистеинемия ?!

23

24 Гомоцистеин и тромбозы

Гомоцистеин и тромбозы

Р а з в и т и е т р о м б о з о в

ГГЦ: вызывает активацию тромбоцитов, моноцитов; оказывает токсическое действие на клетки эндотелия, клетки сосудов гладких мышц; ингибирует действие антикоагулянтов; усиливает прокоагулянтные пути in vitro.

24

25 Гомоцистеин

Гомоцистеин

Гомоцистеин (ГЦ) это содержащая серу аминокислота, являющаяся промежуточным продуктом обмена метионина в организме. Нормальная концентрация ГЦ в крови от 5-15 мкмоль/л

25

26 ?

?

?

Гомоцистеин и тромбозы

Гипергомоцистеинемия

Возможные взаимосвязи между гипергомоцистеинемией и тромботическими осложнениями

Дефициты фолата , в6, в12

Тромботические осложнения

Метаболические расстройства (болезни почек, гипотиреоидизм)

26

27 Концентрация гомоцистеина в крови до и после витаминотерапии

Концентрация гомоцистеина в крови до и после витаминотерапии

28 ± 5,2

16 ± 4,7

18,5 ± 2,1

14 ± 2,9

Группы больных

Группы больных

Уровень гомоцистеина мкмоль/л (М ±m)

Уровень гомоцистеина мкмоль/л (М ±m)

До витаминотерапии

После витаминотерапии

ХМПЗ с тромбозами

Негематологические больные с тромбозами

Лечение : (фолиевая кислота от 2-5мг в день + витамин В12)

Достоверное различие между средними концентрациями ГЦ до и после лечения, р< 0,001

27

28 Хмпз и тромбозы

Хмпз и тромбозы

Показано, что ГГЦ является высоко значимым, независимым фактором риска тромботических осложнений у б-х ХМПЗ Необходимо выявлять и лечить ГГЦ, особенно у больных ХМПЗ с высоким риском тромботических осложнений Лечение фолиевой кислотой в дозе 2-5мг в день и/или витамином В12 0,5-1,0мг в день является доступным, безопасным и эффективным способ достижения нормальной концентрации ГЦ у б-х ХМПЗ

28

29 Новые молекулярные маркеры в дифференциальной диагностике эритремии и

Новые молекулярные маркеры в дифференциальной диагностике эритремии и

вторичного эритроцитоза

29

30 ГИПЕРЭКСПРЕССИЯ mrna ГЕНА PRV-1

ГИПЕРЭКСПРЕССИЯ mrna ГЕНА PRV-1

Ген PRV-1 гиперэкспрессируется в зрелых гранулоцитах у 98-99% пациентов с диагнозом эритремия

Ген PRV-1

(Temerinac et al., Blood,2000)

30

31 Мутация гена тирозинкиназы jak2 v617f

Мутация гена тирозинкиназы jak2 v617f

5’аtgtgtctgt3’

5’аtgtttctgt3’

5’аtgt(g/t)tctgt3’

Норма

Патология

Мутация Jak2 выявляется в зрелых гранулоцитах у 99-100% пациентов с диагнозом эритремия.

Cys Val / Phe Cys

Jak2 мутация

(Levine et al.,Cancer Cell, 2005; James et al. Nature, 2005)

31

32 Цель исследования

Цель исследования

Определение чувствительности и специфичности новых молекулярных маркеров - гиперэкспрессии гена prv-1 и мутации jak2 при проведении диагностики и дифференциальной диагностики эритремии

ГНЦ РАМН,2006,Тутаева В.В.

32

33 Задачи исследования

Задачи исследования

Установить частоту выявления гиперэкспресии гена PRV-1 и мутации Jak2V617F у пациентов относящихся к группе хМПЗ, а так же пациентов с диагнозом вторичного эритроцитоза и здоровых доноров Исследовать в динамике уровень экспрессии гена PRV-1 на фоне проведения цитостатической терапии у пациентов с диагнозом эритремии Определить частоту совпадения гиперэкспресии гена PRV-1, мутации Jak2V617F с ростом эндогенных эритропоэтин-независимых колоний и низким уровнем эритропоэтина

33

34 Характеристика пациентов вошедших в исследование

Характеристика пациентов вошедших в исследование

В исследование вошли 69 пациентов с установленным диагнозом хронических Ph- миелопролиферативных заболеваний

Эритремия n= 46 человек Эссенциальная тромбоцитемия n= 15 человек Идиопатический миелофиброз n= 8 человек

В качестве контрольной группы были включены Здоровые доноры n= 16 человек Пациенты с диагнозом вторичного эритроцитоза n= 16 человек

34

35 МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МАРКЕРЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКЕ

МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МАРКЕРЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКЕ

БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМИ ph- МИЕЛОПРОЛИФЕРАТИВНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ

Экспрессия гена PRV-1 Мутация Jak2V617F Рост эндогенных эритропоэтин-независимых колоний (ЭЭК) Уровень эритропоэтина

35

36 Роль гена PRV-1 в дифференциальной диагностике между эритремией и

Роль гена PRV-1 в дифференциальной диагностике между эритремией и

вторичными эритроцитозами, а также внутри группы хронических Ph-миелопролиферативных заболеваний

Норма

(n= 16)

(n= 46)

(n= 15)

(n= 8)

(n= 16)

Эритремия

Вторичный эритроцитоз

Здоровые доноры

36

Идиопати-ческий миелофиб-роз

Эссенци-альная тромбоци-темия

37 УРОВЕНЬ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА PRV-1 У ПАЦИЕНТОВ С УСТАНОВЛЕННЫМ ДИАГНОЗОМ

УРОВЕНЬ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА PRV-1 У ПАЦИЕНТОВ С УСТАНОВЛЕННЫМ ДИАГНОЗОМ

ХРОНИЧЕСКОГО ph- МИЕЛОПРОЛИФЕРАТИВНОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ

Гиперэкспрессия гена PRV-1

Эритремия (n=46) Эссенциальная тромбоцитемия (n=16) Идиопатический миелофиброз (n=8) Вторичный эритроцитоз (n=16) Здоровые доноры (n=16)

37/46 (80%) 7/15 (47%) 6/8 (75%) не обнаружена не обнаружена

37

38 ВАРИАНТЫ ТЕРАПИИ БОЛЬНЫХ ЭРИТРЕМИЕЙ (n=46)

ВАРИАНТЫ ТЕРАПИИ БОЛЬНЫХ ЭРИТРЕМИЕЙ (n=46)

38

39 Результаты лечения больных эритремией

Результаты лечения больных эритремией

0

9

0

6

19

2

4

2

2

2

Полная ремиссия

Частичная ремиссия

Отсутствие ремиссии

Первичные и не получавшие цитостатической терапии (n=9)

Моно терапия гидроксимочевиной (n=25)

Гидроксимочевина в сочетании с IFN- ? (n=8)

Моно терапия IFN- ? (n=4)

39

40 Уровень экспрессии prv-1 у больных эритремией

Уровень экспрессии prv-1 у больных эритремией

Р=0,042

n= 9

n= 16

(Впервые выявленных и не получавших цитостатической терапии)

40

41 Уровень экспрессии гена prv-1 у больных эритремией, леченых

Уровень экспрессии гена prv-1 у больных эритремией, леченых

гидроксимочевиной

PRV-1/B2m

Эритремия

Здоровые доноры

Р=0,00986

n= 25

n= 16

Гиперэкспрессия prv-1 обнаружена у 21/25 пациентов

41

42 Уровень экспрессии гена prv-1 у больных эритремией, получавших

Уровень экспрессии гена prv-1 у больных эритремией, получавших

монотерапию гидроксимочевиной (исследование в динамике)

Анализ

Анализ

8 месяцев

42

43 УРОВЕНЬ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА PRV-1 У БОЛЬНЫХ ЭРИТРЕМИЕЙ, ПОЛУЧАВШИХ

УРОВЕНЬ ЭКСПРЕССИИ ГЕНА PRV-1 У БОЛЬНЫХ ЭРИТРЕМИЕЙ, ПОЛУЧАВШИХ

ГИДРОКСИМОЧЕВИНУ В СОЧЕТАНИИ С IFN- ?

(Исследование в динамике)

PRV-1/B2m

8 месяцев

№2 анализ

№1 анализ

43

10000

1000

100

10

1

0,1

44 Сопоставление уровня экспрессии гена prv-1 и клинического состояния

Сопоставление уровня экспрессии гена prv-1 и клинического состояния

больных эритремией независимо от проводившейся терапии

n=4

n=12

n=25

44

45 Значение мутации гена Jak2V617F в дифференциальной диагностике между

Значение мутации гена Jak2V617F в дифференциальной диагностике между

пациентами с диагнозом эритремия и вторичными эритроцитозами

Для определения наличия мутации Jak2V716F обследовано 22 пациента с диагнозом эритремия, 3 здоровых доноров, 6 пациентов с диагнозом вторичного эритроцитоза.

У всех пациентов 22/22 с диагнозом эритремии была выявлена мутация Jak2V716F. У здоровых доноров, а так же пациентов с диагнозом вторичного эритроцитоза, она отсутствовала.

45

46 Соотношение mRNA Jak2 несущих и не несущих мутацию V617F у пациентов с

Соотношение mRNA Jak2 несущих и не несущих мутацию V617F у пациентов с

эритремией

46

47 47

47

48 Скрининг периферической крови на мутацию JAK2V617F & измерение уровня

Скрининг периферической крови на мутацию JAK2V617F & измерение уровня

эритропоэтина в сыворотке

V617F(+) и ЭПО ?

V617F(+) но ЭПО в норме или ?

V617F(-) но ЭПО ?

V617F(-) и ЭПО в норме или ?

Диагностический алгоритм для предполагаемой истинной полицитемии (ИП)

Высокая вероятность ИП

Вероятно ИП

Допустимо ИП

Маловероятно ИП

Биопсия к.м. и скрининг на мутацию JAK2 12 экзона

Если результаты противоречат ИП, то это врожденный эритроцитоз с мутацией на рецепторах эритропоэтина

Биопсия к.м. способствует диагнозу, но не обязательна

Биопсия к.м. рекомендуется для подтверждения диагноза

Вторичный эритроцитоз, в т.ч. врожденный эритроцитоз с мутацией Хиппель- Ландау

48

49 Диагностический алгоритм предполагаемой эссенциальной тромбоцитемии

Диагностический алгоритм предполагаемой эссенциальной тромбоцитемии

(ЭТ)

Скрининг периферической крови на JAK2V617F

V617F (+)

V617F (-)

Биопсия к.м. и цитогеника

Высокая вероятность ЭТ, ИП, СЛМ

Возможно ЭТ и СЛМ, но также следует учитывать вероятность ХМЛ

Для уточнения диагноза используются критерии ВОЗ 2008

При отсутствии Ph хромосомы, но наличии незрелых мегакариоцитов рассматривается FISH на bcr-abl

49

50 Биопсия к.м., окрашивание ретикулина, цитогенетика и скрининг на

Биопсия к.м., окрашивание ретикулина, цитогенетика и скрининг на

JAK2V617F мутацию

Хмл

Диагностический алгоритм для предполагаемого сублейкемического миелоза (СЛМ)

Цитогенетика в норме и V617F (-)

Ph хромосома (+)

V617F (+) или del(13q)

Другие цитогенетические нарушения

Есть вероятность СЛМ, используйте гистологическое исследование для исключения других миелоидных опухолей

Возможен СЛМ, а также МДС или другие миелоидные опухоли

При наличии незрелых мегакариоцитов сделайте FISH на bcr-abl или гистологию к.м. для уточнения диагноза

50

51 Биопсия к.м., окраска триптазой, исследование клональности Т-клеток и

Биопсия к.м., окраска триптазой, исследование клональности Т-клеток и

цитогенетическое исследование и FISH или RT-ПЦР для FIP1L1-рецепторов тромбоцитарного фактора роста А (РDGFRA)

Да

Нет

Диагностический алгоритм для первичной эозинофилии (число эозинофилов в крови ? 1.5 х 109 л-1)

FIP1L1-РDGFRА позитивный

5q33 транслокации

8p11 транслокации

Гистология к.м. указывает на изменения иные, чем при эозинофилии

Гистология к.м. обычная, иная, чем при эозинофилии и нет клональных Т - клеток

РDGFRА измененная миелоидная опухоль с эозинофилией

РDGFRВ измененная миелоидная опухоль с эозинофилией

Рецептор фактора роста фибробластов1 измененная миелоидная опухоль с эозинофилией

Используйте гистологию для уточнения диагноза

Бласты в пер. крови >2% или бласты в к.м. >5% или аномальная цитогенетика

Хэл

Гэс

51

«Хронические миелопролиферативные заболевания»
http://900igr.net/prezentacija/meditsina/khronicheskie-mieloproliferativnye-zabolevanija-211170.html
cсылка на страницу
Урок

Медицина

32 темы
Слайды
900igr.net > Презентации по медицине > Болезни > Хронические миелопролиферативные заболевания